پاورپوینت ژنتیک مولکولی (pptx) 44 اسلاید
دسته بندی : پاورپوینت
نوع فایل : PowerPoint (.pptx) ( قابل ویرایش و آماده پرینت )
تعداد اسلاید: 44 اسلاید
قسمتی از متن PowerPoint (.pptx) :
ژنتیک مولکولیMolecular Genetics
مقدمه:
1- کاربرد تکنیکهای جدید ژنتیک مولکولی که امکان آنالیز جزئی ژنهای طبیعی و غیر طبیعی را فراهم ساخته است انقلابی در روشهای تشخیصی و درمانی در بیماریهای ژنتیکی بوجود آورده است.
2- برای انجام تحقیق بر روی اساس مولکولی بیماریهای وراثتی دو مانع اساسی وجود دارد. الف- بدست آوردن مقادیر کافی DNA و RNA. ب- خالص سازی توالی مورد نظر از دیگر قطعات ِDNA یا RNA موجود در سلول.
3- این دو مانع توسط تکنیکهای استخراج DNA و واکنش زنجیره ای پلیمراز (Polymerase Chain Reaction = PCR) قابل برطرف شدن هستند.
استخراج DNA
کاربردهای استخراج DNA
جهت انجام بررسی های مختلف در زمینه امور
1- تشخیصی
2- تحقیقی
3- مهندسی ژنتیك
ضرورت استخراج ADN از نمونه های مورد نظر وجود دارد.
استخراج ژنوم
اساس استخراج ژنوم شامل مراحل زیر است:
1- آماده سازی نمونه
2- از بین بردن دیواره سلولی یا لیز كردن سلول ها
3- جدا كردن مواد غیر از DNA
4- تغلیظ DNA
آماده سازی نمونه ها
1- در این مرحله با توجه به نوع سلول یا بافت مورد نظر اقدام به تهیه مقادیر مناسب از آن میشود. به عنوان مثال جهت استخراج DNA از باكتریها لازم است ابتدا مقادیر لازم از آنها را كشت داد.
2- اغلب باکتریها بدون هیچ مشکلی در یک محیط کشت مایع (broth culture) رشد میکنند.
3- محیط کشت با دور نسبتاً پایین (مثلاً 8000 rpm برای 10 دقیقه) سانتریفوژ شده، مایع رویی دور ریخته شده و رسوب حاصل در مایع مناسبی معلق میگردد.
شكستن دیواره سلولی و یا لیز كردن سلولها
روشهای لیز سلولی به دو روش كلی فیزیكی و شیمیایی تقسیم می شوند.
1- در روش فیزیكی با استفاده از فشار مكانیكی دیواره سلولی شكسته می شود. مثل استفاده از ذرات شیشه، سونیكاتور (امواج ماوراء صوت با انرژی بالا) و فشار مكانیكی از طریق عبور خمیره سلولی از یك مجرای بسیار باریك تحت فشار بسیار بالا (French Press) كه اغلب در ابعاد صنعتی استفاده می شود.
2- در روش شیمیایی با توجه به نوع ماده موجود در دیواره سلولی كه در انواع باكتریهای گرم مثبت و گرم منفی متفاوت است از مواد مختلفی استفاده می شود. در E.coli و انواع مشابه آن كه بیشترین كاربرد را در مهندسی ژنتیك دارند برای سست كردن دیواره سلولی از آنزیم Lysozyme یا ماده EDTA و یا هر دو استفاده می شود.