پاورپوینت محیط ها و روش های کشت

پاورپوینت محیط ها و روش های کشت (pptx) 14 اسلاید

دسته بندی : پاورپوینت

نوع فایل : PowerPoint (.pptx) ( قابل ویرایش و آماده پرینت )

تعداد اسلاید: 14 اسلاید

قسمتی از متن PowerPoint (.pptx) :

به نام خدا محیط ها و روش های کشت مقدمه: باکتری ها براي انجام فعالیت های زيستي خود به مواد غذايي نياز دارند و در نتيجه برای مطالعه باکتری ها بايد شرايط مناسب رشد و نمو آنها را فراهم کرده و در محيط هاي ويژه اي تکثير داده شوند. هنگامي که باکتري ها در شرايط مناسب تکثير داده شوند گفته مي شود که باکتري ها کشت داده شده اند. محيط کشت ترکيبي از مواد خاص است که در آن نيازهاي غذايي باکتري از نظر منبع کربن، انرژي، نيتروژن و هر نوع عامل رشد ديگر در نظر گرفته شده است. امروزه بر حسب نوع باکتري انواع گوناگوني از محيط هاي کشت با ترکيبات متفاوت تهيه مي شود. براي شناسايي عامل بيماري از ميکروارگانيسم يک کشت خالص به دست آورد. پس از تهيه کشت هاي خالص، بررسي هاي ماکروسکوپي، ميکروسکوپي و همچنين مطالعه صفت هاي بيوشيميايي و فيزيولوژيک ميکروارگانيسم جهت شناسايي آن انجام مي گيرد. انواع محيط کشت از نظرشکل و میزان آگار محيط هاي كشت از نظر ويژگي هاي فيزيكي به چهار دسته تقسيم مي شوند: 1- محيط هاي کشت جامد (Solid Media): در این محیط ها 1-2% آگار استفاده شده است. آگار كربوهيدرات غير قابل متابوليسم است و از نوعي جلبک دريايي به دست آمده است اين ماده در حرارت 80-100°Cدر آب حل شده و در حرارت هاي پايين تر از 45°C جامد مي شود. 2- محيط هاي کشت نيمه جامد Semi Solid Media)): در این محیط ها 0/3-0/5% آگار استفاده شده است. مانند محيط SIM 3- محيط هاي کشت مايع يا براث :(Liquid Media) اين محيط ها فاقد آگار هستند. 4- محيط هاي کشت دوفازي (Biphasic): اين محيط ها از يک فاز جامد آگار 2.5%به صورت اسلنت و يک فاز مايع تشکيل شده اند. هر دو فاز مايع و جامد در اين محيط ها از يک ترکيب ساخته مي شود، مانند BHI آگار و BHI براث و يا بروسلا آگار و بروسلا براث. انواع محيط کشت از نظرکاربرد: الف- محيط هاي کشت پايه Basic Media)): این محیط ها براي رشد باكتري با نياز غذايي معمولي مناسب مي باشند و اکثر باکتری ها در این محیط ها قادر به رشد هستند. مانند محيط نوترينت آگار ب- محيط هاي کشت غني شده Enriched Media)): علاوه بر مواد موجود در محیط کشت پایه ترکیباتی مثل خون، سرم، ویتامین عصاره مخمر و ... به محيط پايه اضافه مي شود تا غني تر شود. مانند محيط بلاد آگارblood agar) ) و شکلات آگار که به آنها خون افزوده شده است. پ- محيط کشت غني کننده (Enrichment Media): محيط پايه داراي ترکيباتي است که مي تواند رشد تعداد اندک ميکروارگانيسم پاتوژن را در بين تعداد بسياري از ميکروفلور نرمال ترغيب و تشويق نمايد مانند محيط (Selenit F) انواع محيط کشت از نظرکاربرد: ت- محيط هاي کشت انتخابيSelective Media)): در اين محيط ها موادي وجود دارد که از رشد بسياري از باکتري ها جلوگيري کرده و تنها به باکتري هاي ويژه اي اجازه رشد مي دهند مانند محيط کشت مانيتول سالت آگار(Mannitol Salt Agar) و محيط کشت S.S.A (سالمونلاـ شيگلا آگار) ث- محيط هاي کشت افتراقي Differential Media)): به علت داشتن ترکيباتي ويژه، کلني باکتري هاي مختلف را از يکديگر متمايز مي سازند مانند محيط کشت مک کانکي آگار (MacConkey) و ائوزين متيلن بلو آگار EMB)). ج- محيط هاي کشت انتقالي Transport Media)): در مواردي که بين نمونه برداري و کشت نمونه فاصله زماني وجود دارد از محيط ترانسپورت استفاده مي شود. اين محيط ها بافرهاي نمکي هستند که باکتري را زنده نگه مي دارند بدون اينکه تکثير پيدا کنند مانند محيط استوارت Stuart medium)) و يا محيط کري بلر (Cary & Blair medium). انواع محيط کشت از نظرکاربرد: د- محيط هاي بيوشيميايي: با استفاده از اين محيط ها، مي توان باکتري ها را بر اساس خواص بيوشيميايي گوناگون مانند تخمير قندها، نوع منبع کربن، حرکت، توليد گاز، ذوب ژلاتين و غيره شناسايي کنيم. مانند محيط TSI) Triple Sugar Iron agar) اصول کلي تهيه محيط هاي کشت: تهيه و آماده سازي محيط هاي کشت روش هاي مختلفي دارد. براي تهيه محيط هاي کشت بايد بر اساس روش هاي که بر روي ظروف داراي محيط کشت چاپ شده است عمل شود. الف- محيط کشت مايع: مطابق دستور مندرج روي ظرف داراي محيط کشت مقدار معيني از پودر آماده را بر حسب حجم مورد نياز در آب مقطر حل کرده و در لوله هاي آزمايش به مقدار لازم تقسيم شده و سپس لوله ها براي استريل شدن اتوکلاو مي شوند. ب- محيط کشت جامد: مطابق دستور مندرج روي ظرف حاوی محيط کشت، مقداري از پودر آماده را در حجم مورد نياز آب مقطر حل کرده سپس آن را حرارت داده و آن را اتوکلاو مي کنند. پس از اتوکلاو محيط کشت را تا 45°C خنک نموده. سپس بسته به حجم پليت از محيط كشت درون پليت استريل ريخته، در آن را مي بنديم تا سرد و جامد گردد. پ- محيط کشت جامد شيب دار Slant)): در اين روش محيط کشت را قبل از جامد شدن بر حسب اندازه لوله آزمايش، در داخل ظرف ريخته و پس از استريل کردن به طور مايل در محلي از آزمايشگاه قرار مي دهيم بعد از 10-15 دقيقه محيط کشت جامد مي شود. نكته: لازم به ذکر است که براي تهيه برخي از محيط هاي کشت حرارت دادن لازم نيست و براي تهيه برخي محيط هاي کشت مانند اوره جهت استريل کردن از اتوکلاو استفاده نمي شود بلکه به روش فيلتر کردن استريل مي شود. روش هاي کشت باكتري: 1- روش هاي کشت در محيط هاي مايع: در اين روش با استفاده از لوپ و يا در برخي از موارد که از نمونه کلينيکي برداشت شود با استفاده از سواب، نمونه باکتري را به محيط مايع (در مجاورت شعله) انتقال داده مي شود. کشت در محيط هاي مايع بيشتر جهت تکثير و يا بررسي ويژگي هاي بيوشيميائي باکتري ها استفاده مي شود.   2- کشت در محيط هاي جامد لوله اي شيب دار :(Slant) در اين گونه محيط ها مي توان باكتري را در سطح و يا در سطح و عمق كشت داد. اگر هدف تنها کشت باکتري در سطح محيط مورد نظر باشد، مي توان به وسيله لوپ يا نيدل از نمونه ميکروبي برداشت کرده و به صورت زيگزاگ در سطح محيط کشت داد. اگر کشت در عمق محيط نيز مد نظر باشد، با استفاده از نيدل سيم را در عمق محيط (تا يك سانتي متر فاصله از ته لوله) فرو برده و سپس در سطح محيط به صورت زيگزاگ کشت مي دهيم.